肿瘤射频消融裂解物负载的DCCIK细胞体外抗肿瘤活性实验研究
单婵婵, 石亮荣, 丁美钱, 朱一蓓, 徐斌, 蒋敬庭, 吴昌平
2014, 41 (6):
471-475.
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673422X.2014.06.021
摘要
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目的研究负载射频消融肿瘤原位裂解物的树突状细胞(DC)联合细胞因子诱导杀伤活性细胞(CIK)体外抗肿瘤活性。 方法制备BALB/C小鼠脾脏来源的CIK细胞及骨髓来源的DC,建立射频消融灭活小鼠皮下结肠癌的实验模型,将其原位裂解的肿瘤组织反复冻融后取上清,lowry蛋白定量法定量,以终浓度5 μg/ml载培养第5天的DC(即AgDC),2 d后再与培养第7天的CIK细胞共培养48 h,流式细胞术分析其表面共刺激分子的表达,细胞增殖与毒性检测试剂盒(CCK8试剂盒)检测其体外杀伤活性。 结果DC表面分子表达共刺激分子CD86+ CD11c+、MHC Ⅱ+CD11c+、MHCⅡ+ CD80+双阳性细胞百分含量分别为9.50%、42.4%、53.4%;AgDC表面分子表达共刺激分子双阳性细胞百分含量明显提高,分别为19.2%、74.2%、61.1%。CIK细胞培养第1天,CD3+ NK1.1+双阳性的百分含量为1.45%,第7天CD3+NK1.1+双阳性表达明显提高为36.9%。AgDCCIK细胞对结肠癌细胞C26的杀伤活性明显高于DCCIK、CIK细胞,且相同效靶比下前者的杀伤活性明显高于后者。效靶比为5∶1时,AgDCCIK细胞杀伤率为(74.9±3.5)%,DCCIK细胞杀伤率为(71.2±2.1)%,CIK细胞杀伤率为(68.7±2.9)%,差异有统计学意义(F=7.007,P=0.007);效靶比为10∶1时,AgDCCIK细胞杀伤率为(82.3±4.5)%,DCCIK细胞杀伤率为(77.1±5.1)%,CIK细胞杀伤率为(72.7±2.8)%,差异有统计学意义(F=7.727,P=0.005);效靶比为20∶1时,AgDCCIK细胞杀伤率为(83.2±1.9)%,DCCIK细胞杀伤率为(77.2±4.2)%,CIK细胞杀伤率为(73.0±2.6)%,差异有统计学意义(F=16.594,P=0.000)。 结论负载肿瘤射频消融原位裂解产物的DC联合CIK细胞可以提高体外细胞毒活性,为肿瘤综合治疗提供新策略。
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