目的 探讨白术内酯Ⅱ(ATL-Ⅱ)对结肠癌的抗肿瘤作用及其免疫调节机制。方法 建立C57BL/6小鼠结肠癌皮下移植瘤模型,采用随机数字表法将小鼠随机分为模型组(PBS腹腔注射),ATL-Ⅱ低(20 mg/kg)、中(40 mg/kg)、高(60 mg/kg)剂量组及5-氟尿嘧啶(5-FU 30 mg/kg)组,每组各5只,连续给药21 d。采用HE染色检测肿瘤组织病理变化,免疫组织化学法检测肿瘤组织Ki-67、Caspase-3、Bcl-2表达水平,免疫荧光法检测肿瘤组织CD8+ T、NK1.1细胞阳性细胞率,ELISA法检测血清颗粒酶B(GzmB)、λ干扰素(IFN-λ)水平,蛋白质印迹法检测PD-L1、ERK/MAPK信号通路蛋白表达水平。结果 模型组,ATL-Ⅱ低、中、高剂量组,5-FU组结肠癌移植瘤小鼠肿瘤体积分别为(1 845.17±65.72)、(1 637.20±122.65)、(1 232.86±209.16)、(1 002.29±41.84)、(911.59±294.71)mm3,差异有统计学意义(F=125.61,P<0.001);ATL-Ⅱ低、中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05),且中、高剂量组间差异有统计学意义(P<0.05);5-FU组与ATL-Ⅱ中、高剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。5组小鼠肿瘤质量分别为(1.34±0.11)、(1.26±0.09)、(0.93±0.07)、(0.94±0.10)、(0.59±0.08)g,差异有统计学意义(F=88.88,P<0.001);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);5-FU组与ATL-Ⅱ中、高剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。5组小鼠脾脏指数分别为7.42±0.88、7.38±1.32、8.42±0.78、9.72±1.18、6.16±1.05,差异有统计学意义(F=33.20,P<0.001);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05),且高剂量组高于中剂量组(P<0.05);5-FU组与ATL-Ⅱ中、高剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。HE染色结果表明,模型组小鼠肿瘤组织呈细胞密集、核大深染、异型性、细胞间质减少等典型的恶性肿瘤特征,经ATL-Ⅱ和5-FU处理的小鼠肿瘤组织中,细胞增殖显著减少,细胞排列较为疏松,核分裂现象减少,且坏死区域明显缩小,ATL-Ⅱ中、高剂量组及5-FU组能观察到较小的圆形、椭圆形细胞,核大且染色质深。5组小鼠的Ki-67、Caspase-3、Bcl-2阳性区域占比差异均有统计学意义(F=13.86,P=0.043;F=477.63,P<0.001;F=40.48,P<0.001);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ高剂量组、5-FU组与低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。5-FU组与ATL-Ⅱ中、高剂量组相比,Caspase-3阳性区域占比差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ中、高剂量组间差异有统计学意义(P<0.05)。5组小鼠肿瘤组织CD8+ T细胞阳性细胞率分别为(10.33±3.53)%、(15.00±5.65)%、(30.33±10.51)%、(59.33±9.04)%、(33.62±9.11)%,差异有统计学意义(F=96.33,P<0.001);ATL-Ⅱ低、中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05),且中、高剂量组间差异有统计学意义(P<0.05);5-FU组与ATL-Ⅱ高剂量组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。5组小鼠肿瘤组织中NK1.1细胞阳性细胞率分别为(12.33±6.52)%、(13.00±7.00)%、(35.33±9.51)%、(43.67±12.21)%、(14.50±7.05)%,差异有统计学意义(F=283.17,P<0.001);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ高剂量组与低剂量组相比,差异有统计学意义(P<0.05);5-FU组与ATL-Ⅱ中、高剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。5组小鼠血清GzmB水平分别为(5.00±1.00)、(5.27±0.76)、(8.27±0.61)、(10.00±1.21)、(6.15±0.69)ng/L,差异有统计学意义(F=21.45,P<0.001);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ中、高剂量组与低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05),ATL-Ⅱ中、高剂量组间差异有统计学意义(P<0.05);5-FU组与ATL-Ⅱ中、高剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。5组小鼠血清IFN-λ水平分别为(617.33±65.06)、(743.33±40.41)、(910.00±36.06)、(1 009.00±35.54)、(703.62±56.00)ng/L,差异有统计学意义(F=43.08,P<0.001); ATL-Ⅱ低、中、高剂量组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ中、高剂量组与低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05),且中、高剂量组间差异有统计学意义(P<0.05);5-FU组与ATL-Ⅱ中、高剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。5组小鼠肿瘤组织中PD-L1、p-ERK/ERK及p-MEK/MEK蛋白表达水平差异均有统计学意义(F=125.34,P<0.001;F=89.63,P<0.001;F=35.33,P=0.002)。ATL-Ⅱ低、中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,PD-L1表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05); ATL-Ⅱ高剂量组、5-FU组与低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ中、高剂量组差异有统计学意义(P<0.05);ATL-Ⅱ中剂量组与5-FU组差异有统计学意义(P<0.05)。ATL-Ⅱ低、中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,肿瘤组织中p-ERK/ERK表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05);ATL-Ⅱ中、高剂量组,5-FU组与低剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);5-FU组与ATL-Ⅱ中、高剂量组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。ATL-Ⅱ低、中、高剂量组,5-FU组与模型组相比,肿瘤组织中p-MEK/MEK表达水平差异均有统计学意义(均P<0.05);5-FU组与低剂量组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 白术内酯Ⅱ通过抑制ERK/MAPK信号路活性,降低PD-L1表达,增强CD8⁺ T细胞及NK细胞浸润,促进肿瘤细胞凋亡,从而在结肠癌中发挥抗肿瘤作用。