目的 探究二甲双胍通过调控ALKBH3的表达对食管鳞状细胞癌细胞生长、迁移和血管生成的影响。方法 使用不同浓度(0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L)的二甲双胍处理人食管癌TE-1细胞,将TE-1细胞分为空白对照组,二甲双胍低(0.5 mmol/L)、中(1.0 mmol/L)、高(2.0 mmol/L)浓度组,二甲双胍(2.0 mmol/L)+pcDNA-NC组,二甲双胍(2.0 mmol/L)+pcDNA-ALKBH3组。采用CCK-8法测定细胞活力,克隆形成实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡能力,血管形成实验检测细胞管状结构形成情况。用4~6周龄雄性BALB/c无胸腺裸鼠构建异体移植瘤模型,采用随机数字表法分为模型对照组、二甲双胍组、二甲双胍+pcDNA-NC组和二甲双胍+pcDNA-ALKBH3组,每组6只,测定瘤体体积并称重,采用蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及ALKBH3、血管内皮生长因子A(VEGF-A)蛋白表达水平,免疫组织化学检测CD31蛋白表达。结果 使用0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L二甲双胍处理TE-1细胞48 h后,细胞活力分别为(100.00±0.00)%、(90.31±5.23)%、(81.25±8.65)%、(63.52±6.80)%、(54.64±5.35)%、(31.48±4.21)%,差异有统计学意义(F=98.11,P<0.001);0.5、1.0、2.0、4.0、8.0 mmol/L与0 mmol/L处理组间细胞活力差异均有统计学意义(均P<0.05)。二甲双胍对TE-1细胞的IC50为4.46 mmol/L。空白对照组,二甲双胍低、中、高浓度组,二甲双胍+pcDNA-NC组,二甲双胍+pcDNA-ALKBH3组TE-1细胞克隆形成数目分别为(153.15±13.55)、(134.80±11.62)、(116.24±10.43)、(93.17±8.85)、(89.39±8.46)、(110.26±7.21)个,差异有统计学意义(F=34.28,P<0.001);二甲双胍不同浓度组TE-1细胞克隆形成数随二甲双胍处理浓度增加明显减少(均P<0.05);与二甲双胍+ pcDNA-NC组相比,二甲双胍+pcDNA-ALKBH3组细胞克隆形成数增加(P<0.05)。6组TE-1细胞迁移数目分别为(152.13±13.40)、(133.85±10.72)、(115.28±8.64)、(91.16±7.89)、(85.39±7.23)、(116.85±8.36)个,细胞侵袭数目分别为(135.22±10.77)、(112.07±9.53)、(86.30±7.45)、(69.53±6.74)、(65.81±5.65)、(79.80±6.32)个,差异均有统计学意义(F=41.35,P<0.001;F=69.06,P<0.001);二甲双胍不同浓度组细胞迁移数目和侵袭数目均随二甲双胍处理浓度增加明显减少(均P<0.05);与二甲双胍+pcDNA-NC组相比,二甲双胍+ pcDNA-ALKBH3组细胞迁移数目和侵袭数目均显著增加(均P<0.05)。6组TE-1细胞凋亡率分别为(3.22±1.13)%、(13.82±1.90)%、(22.67±2.53)%、(29.18±3.24)%、(26.84±2.75)%、(16.36±1.63)%,差异有统计学意义(F=103.66,P<0.001);二甲双胍不同浓度组细胞凋亡率随二甲双胍处理浓度增加逐渐增高(均P<0.05);与二甲双胍+pcDNA-NC相比,二甲双胍+pcDNA-ALKBH3组细胞凋亡率较低(P<0.05)。空白对照组细胞管状结构完整,二甲双胍低、中、高浓度组细胞管状结构存在不同程度损坏,二甲双胍+ pcDNA-ALKBH3组细胞管状结构受损程度较低。6组TE-1细胞管状结构数目分别为(38.35±3.20)、(27.15±2.64)、(15.92±3.14)、(7.39±1.50)、(8.61±1.37)、(29.33±4.20)个,差异有统计学意义(F=113.92,P<0.001);与空白对照组相比,二甲双胍低、中、高浓度组细胞管状结构数目逐渐减少(均P<0.05);二甲双胍+ pcDNA-ALKBH3组细胞管状结构数目多于二甲双胍+pcDNA-NC组(P<0.05)。6组TE-1细胞Bcl-2、Bax、ALKBH3和VEGF-A蛋白表达水平差异均有统计学意义(F=56.36,P<0.001;F=57.26,P<0.001;F=159.30,P<0.001;F=132.89,P<0.001);与空白对照组相比,二甲双胍不同浓度组Bcl-2、ALKBH3和VEGF-A蛋白表达均较低,Bax蛋白表达水平均较高(均P<0.05);与二甲双胍+pcDNA-NC相比,二甲双胍+pcDNA-ALKBH3组Bcl-2、ALKBH3和VEGF-A蛋白表达水平均较高,Bax表达水平均较低(均P<0.05)。模型对照组、二甲双胍组、二甲双胍+pcDNA-NC组和二甲双胍+pcDNA-ALKBH3组裸鼠移植瘤肿瘤质量分别为(1.16±0.12)、(0.46±0.05)、(0.50±0.06)、(1.19±0.14)g,肿瘤体积分别为(878.36±108.93)、(413.59±50.23)、(439.78±51.39)、(793.75±96.98)mm3,差异均有统计学意义(F=96.61,P<0.001;F=51.90,P<0.001);二甲双胍组较模型对照组肿瘤质量降低、体积减小(均P<0.05);二甲双胍+pcDNA-ALKBH3组较二甲双胍组和二甲双胍+pcDNA-NC组肿瘤质量升高、体积增大(均P<0.05)。CD31主要分布在肿瘤细胞质内和细胞膜上。4组移植瘤组织CD31阳性率和VEGF-A蛋白表达水平差异均有统计学意义(F=7.12,P=0.002;F=48.81,P<0.001);二甲双胍组CD31阳性率和VEGF-A蛋白表达水平均低于模型对照组,二甲双胍+ pcDNA-ALKBH3组中CD31阳性率和VEGF-A蛋白表达水平高于二甲双胍组和二甲双胍+pcDNA-NC组(均P<0.05)。结论 二甲双胍可通过降低ALKBH3的表达抑制食管鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和肿瘤血管生成。