目的 探讨多西他赛(Doc)诱导的非小细胞肺癌多倍体肿瘤巨细胞细胞衰老、肿瘤干细胞和细胞增殖特征,分析多倍体肿瘤巨细胞在肿瘤复发中的潜在作用。方法 二甲基亚砜(DMSO)或100 nmol/L Doc处理非小细胞肺癌NCI-H1299细胞24 h,更换新鲜的完全培养基继续培养3 d,分别记为对照组和Doc组。显微镜观察细胞生长状态,免疫荧光染色检测细胞核形态,流式细胞术检测DNA含量,台盼蓝染色统计细胞密度,衰老相关的β-半乳糖苷酶染色检测β-半乳糖苷酶活性,实时荧光定量PCR检测转录因子Krüppel样因子4 (KLF4)和NANOG的mRNA表达水平,Doc组细胞长期培养观察多倍体肿瘤巨细胞生长情况。结果 Doc处理NCI-H1299后,细胞体积变大,细胞核体积变大。Doc组多倍体百分比为45.80%±1.73%,明显高于对照组的4.83%±0.72%,差异具有统计学意义(t=-29.01,P<0.001)。Doc组细胞密度为(8.18±0.54)×104/cm2,明显高于对照组的(0.75±0.08)×104/cm2,差异具有统计学意义(t=23.55,P<0.001)。Doc组细胞衰老相关的β-半乳糖苷酶活性增加,统计阳性染色(蓝色)细胞百分比为56.21%±3.38%,明显高于对照组的4.20%±0.79%,差异具有统计学意义(t=-47.37,P<0.001)。与对照组(1.00±0.16)相比,Doc组KLF4的mRNA表达水平(2.47±0.18)较高,差异具有统计学意义(t=-10.74,P<0.001)。与对照组(0.99±0.07)相比,Doc 组NANOG的mRNA表达水平(5.58±0.26)较高,差异具有统计学意义(t=-30.09,P<0.001)。Doc组细胞继续培养5 d,细胞保持大细胞状态,视野内细胞较少;继续培养7 d,大细胞周围出现小的子代细胞,视野内细胞仍较少;继续培养13 d,子代细胞数量明显增多; 继续培养15 d,子代细胞最终占满整个视野。结论 Doc诱导非小细胞肺癌NCI-H1299细胞产生多倍体肿瘤巨细胞,表现出衰老、干性和再增殖特征,可能促进肿瘤复发。