DCC基因对人结直肠癌细胞株SW1116生物学行为的影响
姜洪伟, 王举, 李海军, 彭际奎, 高小平, 陈峰
2014, 41 (8):
628-632.
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2014.08.021
摘要
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目的研究外源性DCC基因稳定转染对人结直肠癌SW1116细胞株的作用。方法采用反转录聚合酶链反应从人正常结肠组织中扩增DCC基因功能区片段,构建pcDNA3.1(+)DCC重组质粒并鉴定。将重组质粒转染入DCC基因缺失的结直肠癌SW1116细胞中,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察其抑制结直肠癌细胞SW1116的作用;用免疫荧光方法研究pcDNA3.1(+)DCC质粒转染人结直肠癌细胞SW1116后对结直肠癌细胞的影响及癌胚抗原(CEA)表达。结果转染pcDNA3.1(+)DCC质粒的SW1116细胞在转染后第3~6天,其细胞数显著低于转染pcDNA3.1(+)质粒的SW1116细胞和正常细胞对照(t=3.645,P<0.05;t=3.132,P<0.05);转染pcDNA3.1(+)DCC质粒的SW1116细胞生长增殖速度低于转染pcDNA3.1(+)质粒的SW1116细胞和正常细胞对照(t=2.134,P<0.05;t=2.736,P<0.05)。转染pcDNA3.1(+)DCC质粒的SW1116细胞在转染后第2~6天,其总细胞活力显著低于正常细胞对照(t=3.053,P<0.05);转染pcDNA3.1(+)DCC质粒的SW1116细胞在转染后第2、4、5、6天,其总细胞活力显著低于转染空质粒对照(t=2.816,P<0.05)。转染pcDNA3.1(+)DCC质粒的SW1116细胞呈黄绿色荧光的细胞数量和荧光强度明显低于转染pcDNA3.1(+)质粒的SW1116细胞和对照组细胞。结论转染DCC基因能抑制结直肠癌细胞的生长增殖,降低CEA表达,从而降低结直肠癌细胞浸润转移能力。
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