目的 探究核糖核苷酸还原酶调节亚基M2(RRM2)通过调控周期蛋白依赖性激酶(CDK)1对胃癌细胞恶性生物学行为及有氧糖酵解的影响。方法 将人胃癌MKN-45细胞分为si-NC组(转染空白片段)、CoCl2+si-NC组(低氧环境转染空白片段)、CoCl2+si-RRM2组(低氧环境沉默RRM2)、CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 NC组(低氧环境沉默RRM2+空白载体)、CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 CDK1组(低氧环境沉默RRM2+过表达CDK1)。实时荧光定量反转录PCR分析RRM2和CDK1 mRNA的相对表达量;免疫共沉淀分析RRM2和CDK1蛋白间的相互作用;MTT法检测细胞增殖活性;细胞划痕实验检测细胞迁移距离;流式细胞术检测细胞凋亡水平;三磷酸腺苷(ATP)和葡萄糖试剂盒检测ATP产生和葡萄糖消耗情况;蛋白质印迹法检测ENO1、RRM2、HK2、PKM2、GLUT1及p-CDK1/CDK1蛋白表达情况。结果 实时荧光定量反转录PCR结果显示,si-NC组、CoCl2+si-NC组和CoCl2+si-RRM2组CDK1 mRNA相对表达量分别为1.01±0.15、1.30±0.06、0.51±0.18,RRM2 mRNA相对表达量分别为1.03±0.32、1.59±0.28、0.44±0.17,差异均有统计学意义(F=25.52,P=0.001;F=14.47,P=0.005);与si-NC组比较,CoCl2+si-NC组细胞RRM2和CDK1 mRNA表达均较高;与si-NC组、CoCl2+si-NC组比较,CoCl2+si-RRM2组细胞RRM2和CDK1 mRNA表达均较低(均P<0.05)。免疫共沉淀结果显示,RRM2与CDK1之间存在相互作用。MTT法、细胞划痕实验和流式细胞术结果显示,si-NC组、CoCl2+si-NC组、CoCl2+si-RRM2组、CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 NC组和CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 CDK1组细胞增殖活性分别为1.04±0.01、1.18±0.04、0.84±0.03、0.81±0.03、0.93±0.05,细胞迁移距离分别为(301.83±2.75)、(369.67±0.76)、(176.50±6.38)、(175.83±3.69)、(254.17±1.61)μm,细胞凋亡率分别为8.05%±0.21%、5.75%±0.20%、28.28%±0.04%、30.18%± 1.51%、17.79%±0.22%,差异均有统计学意义(F=73.82,P<0.001;F=1 600.01,P<0.001;F=787.15,P<0.001);与si-NC组和CoCl2+si-NC组比较,CoCl2+si-RRM2组、CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 NC组和CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 CDK1组细胞增殖、迁移能力较弱,细胞凋亡率较高(均P<0.05);与CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 NC组比较,CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 CDK1组细胞增殖、迁移能力较强,细胞凋亡率较低(均P<0.05)。ATP和葡萄糖检测结果显示,5组细胞ATP产生量和葡萄糖消耗量差异均有统计学意义(F=12.53,P<0.001;F=19.21,P<0.001);与si-NC组比较,CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 CDK1组细胞葡萄糖消耗量较少(P<0.05);与CoCl2+si-NC组比较,CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 CDK1组细胞ATP产生量和葡萄糖消耗量均较少(均P<0.05);与CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 NC组比较,CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 CDK1组细胞ATP产生量和葡萄糖消耗量均较多(均P<0.05)。蛋白质印迹法检测显示,5组细胞ENO1、RRM2、HK2、PKM2、GLUT1、p-CDK1/CDK1蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.001);与si-NC组和CoCl2+si-NC组比较,CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 CDK1组细胞ENO1、RRM2、HK2、PKM2、GLUT1和p-CDK1/CDK1蛋白表达均较低(均P<0.05);与CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 NC组比较,CoCl2+si-RRM2+pcDNA3.1 CDK1组细胞ENO1、RRM2、PKM2、GLUT1和p-CDK1/CDK1蛋白表达均较高(均P<0.05)。结论 沉默RRM2可通过调控CDK1抑制胃癌细胞恶性生物学行为及有氧糖酵解的发生。