国际肿瘤学杂志 ›› 2018, Vol. 45 ›› Issue (8): 453-459.doi: 10.3760/cma.j.issn.1673422X.2018.08.002
陈炯玉,庄轶轩,庄珊珊,彭琳
Chen Jiongyu, Zhuang Yixuan, Zhuang Shanshan, Peng Lin
摘要: 目的研究蛇床子素对人鼻咽癌CNE2细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响,并探讨其调节CNE2细胞上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法体外培养CNE2细胞,以0、20、40、80 μg/ml蛇床子素分别处理CNE2细胞24、48 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、Transwell实验分别检测其对细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,以0 μg/ml蛇床子素处理组为对照组。反转录聚合酶链反应(RTPCR)和Western blotting方法分别检测EMT标志物上皮钙黏着蛋白(Ecadherin)、波形蛋白(vimentin)及Wnt/βcatenin信号通路组分βcatenin、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的转录和蛋白表达水平。结果作用24 h和48 h后,0、20、40、80 μg/ml蛇床子素处理组细胞增殖抑制率分别为0.00%±0.00%、7.45%±0.87%、14.12%±2.29%、27.26%±0.43%和0.00%±0.00%、13.44%±0.84%、29.03%±0.78%、57.49%±1.70%,差异均有统计学意义(F=174.33,P<0.001;F=1 041.40,P<0.001),进一步两两比较,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。采用不同浓度的蛇床子素(0、20、40、80 μg/ml)处理CNE2细胞48 h后,细胞迁移细胞数分别为52.13±4.49、29.00±4.49、18.50±1.93、13.75±2.77,差异有统计学意义(F=200.37,P<0.001),进一步两两比较,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。采用不同浓度的蛇床子素(0、20、40、80 μg/ml)处理CNE2细胞48 h后,细胞侵袭数分别为46.63±2.87、24.13±2.87、16.75±5.29、11.00±1.77,差异有统计学意义(F=131.92,P<0.001),进一步两两比较,差异均具有统计学意义(均P<0.01)。采用不同浓度的蛇床子素(0、20、40、80 μg/ml)作用于人鼻咽癌CNE2细胞48 h后,Ecadherin mRNA(1.00±0.13、2.61±0.03、3.12±0.09、3.60±0.06;F=20.92,P<0.001)和Ecadherin蛋白表达(0.22±0.03、0.35±0.01、0.60±0.04、0.82±0.03;F=178.63,P<0.001)差异有统计学意义,进一步两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。同时,采用不同浓度蛇床子素(0、20、40、80 μg/ml)处理CNE2细胞48 h后,vimentin的mRNA表达(1.00±0.12、0.68±0.03、0.56±0.01、0.40±0.09;F=9.48,P<0.010)、βcatenin的mRNA表达(1.00±0.14、0.78±0.04、0.69±0.07、0.46±0.12;F=4.84,P<0.050)和cyclin D1的mRNA表达(1.00±0.09、0.82±0.03、0.58±0.09、0.40±0.03;F=9.49,P<0.010)差异均有统计学意义,各组间进一步两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);vimentin的蛋白表达(0.85±0.02、0.74±0.01、0.34±0.01、0.27±0.01;F=610.58,P<0.001)、βcatenin的蛋白表达(0.83±0.00、0.44±0.02、0.39±0.00、0.23±0.03;F=985.74,P<0.001)、cyclin D1的蛋白表达(0.86±0.02、0.67±0.00、0.35±0.01、0.25±0.01;F=910.57,P<0.001)差异均有统计学意义,各组间进一步两两比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论蛇床子素可抑制CNE2细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制可能与调节Wnt/βcatenin信号通路进而抑制EMT过程有关。