微小RNA-143抑制食管癌细胞株ECA109的增殖、迁移和侵袭
吴文学,刘万平,刘合波,陈洁,孙艳燕,邹传涛,李艳梅
2016, 43 (11):
801-805.
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-422X.2016.11.001
摘要
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目的 研究微小RNA143(miR143)在食管癌细胞株ECA109中的作用。方法ECA109细胞分为转染阴性对照组、miR143模拟剂组和miR143抑制剂组,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞的增殖;Annexin VFITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡;Transwell实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;实时荧光定量PCR和Western blotting分别检测Kras mRNA及蛋白表达水平。结果转染3 d和4 d后,与阴性对照组相比(吸光度值分别为0.90±0.02和1.09±0.07),miR143模拟剂组ECA109细胞增殖受抑制(吸光度值分别为0.66±0.05和0.80±0.04),而miR143抑制剂组细胞增殖增加(吸光度值分别为1.13±0.09和1.51±0.08),各组之间差异有统计学意义(F=49.16,P=0.000;F=100.34,P=0.000)。阴性对照组、miR143模拟剂和抑制剂组的早期凋亡率分别为3.42%±0.72%、11.63%±1.15%和0.94%±0.10%,各组之间差异有统计学意义(F=151.61,P=0.000)。与阴性对照组相比(迁移细胞数336±13,侵袭细胞数147±16),miR143模拟剂组的细胞迁移(148±16)和侵袭(75±10)能力降低,而miR143抑制剂组的细胞迁移(510±14)和侵袭(238±16)能力增加,各组之间差异有统计学意义(F=470.99,P=0.000;F=90.04,P=0.000)。相对于阴性对照组(1.00±0.00),miR143模拟剂抑制ECA109细胞中Kras mRNA(0.22±0.08)及蛋白(0.46±0.08)表达,而miR143抑制剂上调Kras mRNA(1.55±0.12)及蛋白(1.33±0.05)表达,各组之间差异有统计意义(F=131.36,P=0.000;F=88.17,P=0.000)。结论miR143在食管癌细胞株ECA109中发挥抑癌基因作用,下调Kras蛋白表达可能是其发挥抑癌作用的机制之一。
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